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冷凍切片機的操作步驟與注意事項有哪些?
冷凍切片機的操作步驟是什么?一般來講,步驟主要有以下五步,具體的操作如下,為:
(1)取材。
(2)取出組織支承器,放平擺好組織,周邊滴上包埋劑,速放于冷凍臺上,冰凍。
(3)將冷凍好的組織塊,夾緊于切片機持承器上,啟動粗進退鍵,轉動旋鈕,將組織修平。
(4)調好欲切的厚度,一般在5—10um間。
(5)調好防卷板。制作冰凍切片,關鍵在于防卷板的調節上,這就要求操作者要細心,準確地將其調較好,調校至適當的位置。切片時,切出的切片能在時間順利地通過刀防卷板間的通道,平整地躺在持刀器的鐵板上。這時便可掀起防卷板,取一載玻片,將其附貼上即可。
介紹完冷凍切片機的操作步驟,下面我們來談談冷凍切片機在操作時的注意事項,總結歸納一下,有以下這些,為:
(1)防卷板及切片刀和持刀架上的板塊應保持干凈,需經常用毛筆挑除切片殘余和用柔軟的紙張擦。有時需要每切完一張切片后就用紙擦一次。因為這個地方是切片通過和附貼的地方,如果有殘余的包埋劑粘于刀或板上,將會破壞甚至撕裂切片,便切片不能完整切出。
(2)放置組織冰凍前,應視組織的形狀及走勢來放置,如果胡亂放置,就不能收到很好的效果。
(3)組織塊不須經各種固定液固定。
(4)當切片時,如果發現冰凍過度時,可將冰凍的組織連同支承器取出來,在室溫停留片刻,再行切片,或者用口中哈氣,或者用大拇指按壓組織塊,以此來軟化組織,再行切片。另者,調高冰凍點。
(5)用于附貼切片的載玻片,不能存放于冷凍處,于室溫存放即可。因為當附貼切片時,從室溫中取出的載玻片與冷凍箱中的切片有一種溫度差,當溫度較高的載玻片附貼上溫度較低的切片時,由于兩種物質間溫度的差別,當它們碰撞在一起時,分子彼此間發生轉移而產生了一種吸附力,使切片與載玻片牢固地附貼在一起。如果使用冷藏的載玻片來附貼切片,由于溫度相同,沒有發生上述的現象。